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olink超灵敏蛋白组学

发布日期:2021-08-18 浏览次数:1361

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        Olink技术源自于瑞典一家名为Olink Proteomics的创新蛋白质组检测方案公司,专注于为精准医学/转化医学/药物研发提供创新biomarker检测方案。其核心采用了一种独有的称为邻近延伸分析(Proximity Extension Assay,PEA)的蛋白质组检测技术,实现了蛋白组学检测技术在通量、特异性、灵敏度等方面的突破。该技术可同时准确、快速检测人体内上千种蛋白质,仅需较低的样品量,就可提供优质的数据结果。


Olink技术原理

        PEA技术(Olink专利技术)使用一对匹配的抗体,分别偶联独有的DNA寡核苷酸链,形成具有高特异性的探针,与待检测物结合后,相近的两条DNA链互补延伸,生成新的DNA分子模板;再通过qPCR扩增,放大信号进行检测。


Olink技术在biomarker筛选中几大亮点

        超灵敏:目标蛋白检测检测灵敏度高可达到fg/mL级别。可以在组学水平上检测疾病相关的成百上千种低丰度蛋白(尤其是血浆、血清、脑脊液、肿瘤组织液、尿液等各种体液样本中的关键低丰度biomarker)。

        线性范围广:检测范围能够跨越10个数量级,无论高丰度还是低丰度的目标蛋白都能检测。

        超特异性:PEA独特的方法设计,避免了在其他多重抗体反应中常见的非特异性结合影响。而且每一个目标蛋白都是明确的靶向biomarker,克服了既往蛋白组学方法的特异性挑战。

        覆盖度广:可同时检测上千种生物标志物。

        样本需求量少:每个检测panel仅需1 μL样本。


检测流程


Olink产品方案


Target 96和Target 48 panel

        针对不同的疾病类型,Olink优化了不同的panel,分别用来检测心血管代谢、心血管、发育、免疫反应、肿瘤免疫、炎症、代谢、神经系统疾病、肿瘤、器官损伤、小鼠样本等不同应用场景。



        每一个Target 96 panel都可以检测96种蛋白;每一个Target 48 panel可以检测48种蛋白。


Explore 384/1536/3072 Panel

        Olink在NGS平台上优化了Explore-1536 panel,用来检测1536种蛋白;包括4个384-plex蛋白,分别用来有侧重地研究诸如肿瘤、感染、神经、心血管代谢等领域。同样,这些名称只是分类代称,实际上384-plex panel对于目标蛋白等覆盖是跨疾病领域的。我们同样可以视您的研究兴趣进行panel search的匹配。同时,Explore-3072 panel即将上线,其基本包含了目前研究中所涉及到的全部蛋白。





        阿尔茨海默病(AD)是痴呆症的最常见病因,影响高达10%的65岁及以上人群。迄今为止,针对AD的疾病缓解疗法的开发主要针对其病理特征之一,即淀粉样蛋白β(Aβ)和tau,但伴随着很高的临床试验失败率。

        同时,来自人类遗传学,神经影像学和体内建模的最新证据强烈暗示了AD的其他疾病机制,尚未通过已建立的Aβ和tau生物标记物反映出来。这些潜在的病理生理过程,例如炎症,膜磷脂失调和神经血管破坏,较少地被研究因此仍然缺乏很好的了解。

        AD病人体液的蛋白质组学分析可能有助于鉴定与AD病理学相关的新型治疗靶标和生物标志物。在此研究中,科研人员使用了瑞典BioFINDER队列中的样本,包括415个Aβ阴性认知正常(CN)个体(Aβ-CN),142个Aβ阳性CN(Aβ+ CN),50个Aβ阴性且轻度认知障碍(MCI)患者,75个Aβ+ MCI患者和161位Aβ+ AD患者。

        利用Olink技术,Biogen团队和其他科研人员检测了所有患者的CSF和血浆样本中的270个蛋白生物标志物,并采用了一个独立验证队列,包括59Aβ-CN,23Aβ-+ CN,44Aβ-MCI和53Aβ+ MCI,对结果进行了验证。

        为了比较患者和对照组的蛋白质浓度,研究者应用了针对年龄,性别,药物,吸烟和平均受试者水平蛋白质浓度进行调整的多元线性回归,并校正了错误发现率的发现(FDR,q <0.05)。

        最终,研究者筛选并验证了Aβ+个体中十种显著变化的CSF蛋白,包括CHIT1,SMOC2,MMP-10,LDLR,CD200,EIF4EBP1,ALCAM,RGMB,tPA和STAMBP。

        此外,他们还筛选并验证了Aβ+个体中六种显著变化的血浆蛋白,包括OSM,MMP-9,HAGH,CD200,AXIN1和uPA。基于血浆生物标志物,研究者可以将CN区分为 “AD痴呆” (AUC=0.94,95%CI =0.87-0.98)和 “前驱性AD” (AUC=0.78,95%CI=0.68-0.87)。

        这些发现再次强调了免疫标志物,磷脂,血管生成蛋白和其他生物标志物在AD中Aβ-和tau下游的潜在作用,并可能与之正交并确定候选的生物标志物,以便更早地检测神经退行性病变。